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专利速递:一种基于全基因组CRISPR/Cas9文库筛选异种移植抗原基因的方法

2019-10-31来源:智农361
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      2019年10月22日,国家知识产权局公开了由云南农业大学魏红江;赵恒; 李鸿辉; 角德灵; 赵红业等人发明设计的专利--一种基于全基因组CRISPR/Cas9文库筛选异种移植抗原基因的方法 。

      该发明涉及一种基于全基因组CRISPR/Cas9文库筛选异种移植抗原基因的方法,属动物基因编辑技术领域?;贑RISPR/Cas9基因编辑系统,针对猪基因组范围内的全部基因各设计1?2条靶向sgRNA,构建sgRNA慢病毒载体随机敲除文库并转染至HEK293T细胞中,收集病毒再转染至猪PK15细胞中,将转入病毒的猪PK15细胞包被到灵长类的胸腺或肾包膜下,或用人血清进行体外培养,分别在不同的时间内回收存活的细胞,再对回收的活细胞建立单细胞DNA文库或进行单细胞培养扩增后提取DNA,再用慢病毒载体上的通用引物扩增含有sgRNA的上述DNA片段,对敲除的单细胞基因位点进行定型,最终确定并查找出相关基因的信息。该发明的实施对猪作为异种器官移植过程中猪细胞表面新抗原的挖掘具有重要的指导意义。  

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[责任编辑:renxinxin] 标签: 基因编辑 CRISPR/Cas9
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